产品概述
Alexa Fluor (AF) 系列荧光染料是覆盖可见光至近红外光谱区域的高亮度、高光稳定性荧光染料。 博雅生物自研的 AF NHS Ester 系列采用高纯度活性染料偶联 NHS 酯基团，可高效标记蛋白质、抗体等含氨基基团的生物分子， 广泛用于免疫荧光 (IF)、流式细胞术 (FCM)、FISH 原位杂交、蛋白质标记及超分辨显微镜 (STED/STORM) 等应用。
与传统 FITC、Cy 系列染料相比，AF 染料具有更高的量子产率、更强的抗光漂白能力和更宽的 pH 耐受范围 (pH 4-10)， 是多色流式 Panel 设计和长时程荧光观察的理想选择。
核心参数对比
| 染料 | 颜色 | Ex (nm) | Em (nm) | ε (M⁻¹cm⁻¹) | Φ | 相对亮度 | 激光线 | 价格 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| AF488 | 绿色 | 496 | 519 | 71,000 | 0.92 | ~65,000 | 488 nm (Ar) | 1mg ¥1,399 / 5mg ¥4,980 |
| AF532 | 黄色 | 532 | 553 | 81,000 | 0.61 | ~49,000 | 532 nm (Nd:YAG) | 1mg ¥1,499 / 5mg ¥5,280 |
| AF594 | 红色 | 590 | 617 | 92,000 | 0.66 | ~61,000 | 594 nm (He-Ne) | 1mg ¥1,399 / 5mg ¥4,980 |
| AF647 | 远红 | 650 | 665 | 270,000 | 0.33 | ~89,000 | 633/635 nm | 1mg ¥1,499 / 5mg ¥5,280 |
| AF700开发中 | 近红外 | 702 | 723 | 205,000 | 0.25 | ~51,000 | 690 nm | 开发中 |
注：相对亮度 = ε × Φ，数值越大荧光信号越强。AF647 凭借超高消光系数成为远红区最亮染料。
典型应用
🔬
免疫荧光 (IF)
抗体标记、细胞组织染色，高信噪比成像
📊
流式细胞术 (FCM)
多色流式 Panel 设计，各通道干扰低
🧬
FISH / 原位杂交
核酸探针标记，高灵敏度检测
🏷️
蛋白质标记
NHS 酯高效偶联氨基基团
🔎
超分辨显微镜
STED/STORM 兼容，高光稳定性
多色 Panel 组合建议
基于光谱分离原则推荐的五色 Panel 组合，通道间串扰最小：
| 通道 | 染料 | 激光 (nm) | 滤光片 | 检测目标示例 |
|---|---|---|---|---|
| FL1 | AF488 | 488 | 530/30 | CD4, GFP, FITC 通道 |
| FL2 | AF532 | 532 | 575/25 | CD8, PE 通道替代 |
| FL3 | AF594 | 594 | 630/30 | CD3, Texas Red 通道 |
| FL4 | AF647 | 633 | 660/20 | CD45, APC 通道 |
| FL5 | AF700 | 690 | 720/30 | Live/Dead, 高表达标志物 |
免责声明：以上参数参考 Thermo Fisher Scientific (Molecular Probes) 公开技术文档及学术文献整理， 实际值可能因批次和测定条件略有差异，请以产品出厂 CoA 为准。Alexa Fluor 为 Thermo Fisher Scientific 的注册商标。
